如何提取血清白蛋白?

一、所需材料

 
胎牛血清取近郊屠宰場，以檸檬酸三鈉為抗凝劑，血液搜集后隨即分別出血漿備用。需要的試劑有血清白蛋白；溴甲酚氯；醋酸纖維素薄膜，別的試劑均為分析純。獲取胎牛血清白蛋白需要準(zhǔn)備 LG-6型大容量冷凍離心機(jī)，DF-C型電泳儀，UV-754型紫外可見分光光度計(jì)，PHS-2型酸度計(jì)。
 
 
二、具體方法
白蛋白含量測定 選用溴甲酚氯法，以胎牛血清白蛋白為規(guī)范. 白蛋白純度的測定 選用醋酸纖維素薄膜電泳法。吸光度值的測定 用分光光度計(jì)直接測定蛋白質(zhì)溶液在波長為403 nm處的光吸收值，然后折算成濃度為10 g/L時(shí)牛血清白蛋白的光吸收值，用A403表明。
 
 
胎牛血清白蛋白的生產(chǎn)工藝 新鮮抗凝牛血用LC-6型大容量離心機(jī)(3 000 r/min×30 min)離心分別出血漿，加一定量的蒸餾水稀釋，再參與恰當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑和蛋白沉淀劑，然后按下述方法進(jìn)行試驗(yàn)處理：
 
 
1.不一樣pH值溶液對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在其它條件固定的情況下，試驗(yàn)不一樣pH值對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
 
2.不一樣加熱保溫時(shí)間對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在選定的pH值和其它條件固定的情況下，試驗(yàn)不一樣加熱保溫時(shí)間對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
 
3.不一樣稀釋倍數(shù)對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在選定的pH值和保溫時(shí)間及其它條件固定的情況下，試驗(yàn)不一樣稀釋倍數(shù)對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
 

4.不一樣加熱溫度對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在其它條件選定的情況下，試驗(yàn)不一樣加熱溫度對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。

 

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