產品名稱：Cell Counting Kit-8 細胞增殖及毒性檢測試劑盒(CCK-8),增強型
產品編號：HYCCK-8241
產品組成 500T
CCK-8 增強型溶液 5ml
產品價格：299元

產品簡介
Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8），是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。CCK-8試劑中含有WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽）是一種類似于MTT的化合物，它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓（1-Methoxy PMS）存在條件下，可以被線粒體內的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產物Formazan （參考圖1），生成的Formazan數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析，細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。

操作步驟
制作標準曲線（測定細胞具體數量時）

1.制備細胞懸液：細胞計數。

2.接種到 96 孔板中：按比例（例如：1/2 比例）依次用培養基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做 3-5 個細胞濃度梯度，每組 3-6 個重復孔。每孔約 100μl 細胞懸液。

3.37℃培養箱中培養：細胞接種后貼壁大約需要培養 2-4 小時，如果不需要貼壁，這步可以省去。

4.每孔加入 10μl CCK-8 增強型溶液：由于每孔加入 CCK-8 量比較少，有可能因試劑沾在孔壁帶來誤差，建議在加完試劑后輕輕敲擊培養板以幫助混勻?；蛘咧苯优渲煤?10% CCK-8 的培養基，以換液的形式加入。注意不要在孔中生成氣泡，以免影響吸光度的檢測。

5.培養箱內孵育一定時間后測定 450nm 吸光度，制作出一條以細胞數量為橫坐標(X軸)，吸光度為縱坐標(Y 軸)的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量（使用此標準曲線的前提是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數量以及加入 CCK-8 后的培養時間。）

保存條件：4℃避光保存，一年有效。-20 ℃可以儲藏更久，但反復凍融會增加背景值，干擾實驗測定，因此請將經常使用的試劑保存在4 ℃。